产品货号：
KL221225
中文名称：
Cap0 RNA合成试剂盒
英文名称：
RNA Cap0 Capping Kit
产品规格：
40T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
简要说明：
产品特点：
产品组成：
保存：-20℃，有效期1年。
使用方法：
一、体外转录制备RNA模板（本试剂盒不含所需试剂）
二、Cap0加帽反应
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真核生物mRNA 5’端的帽结构为mRNA的稳定、转运和翻译所需，但体外转录制备得到的RNA并没有帽结构。为了提高这些RNA在体外翻译、转染和微注射应用的稳定性，很有必要为其加上Cap0帽结构。本制品是专门用于为无帽RNA分子加上Cap0帽结构的试剂盒。Cap0帽结构又叫m7GpppN帽结构或m7G帽结构。此加帽过程由RNA triphosphatase、guanylyltransferase和guanine methyltransferase三个酶催化的连贯反应组成。
产品特点：
- 即开即用，用户只需提供RNA即可。
- 加帽效率高，接近90%。比使用核苷酸衍生物进行体外转录效率更高。
- 得到的带Cap0帽结构的RNA可以用于各自后续细胞内实验。但如果需要进行体内实验，需要改用本公司的加Cap1试剂盒。因为Cap0 RNA不能逃逸免疫反应而Cap1 RNA可以。
- 本试剂盒足够40次20μL体系的RNA加Cap0帽实验，每次可以处理多达10μg的无帽RNA。
产品组成：
| 组分 | 规格 |
| RNA加Cap0反应液A | 80μL |
| RNA加Cap0反应液B | 40μL |
| RNA加Cap0反应液C | 40μL |
| RNA加Cap0酶(10U/μL) | 40μL |
保存：-20℃，有效期1年。
使用方法：
一、体外转录制备RNA模板（本试剂盒不含所需试剂）
- 用自备的体外转录剂盒制备RNA模板。
- 纯化RNA并测定其浓度。纯化的RNA需要溶解在RNase-free水中。
二、Cap0加帽反应
- 在一个RNase-free离心管中，加入10μg的纯化的无帽RNA，补RNase-free水到15μL。
- 65℃变性10分钟后，放冰上待用。变性能打开可能空间阻碍酶接触RNA末端的二级结构，非常重要。如果加帽效果不好，还可以提高温度到75℃和85℃变性10分钟。
- 再在另外一个RNase-free离心管中加入下列成分：
成分 用量 RNA加Cap0反应液A 2μL RNA加Cap0反应液B 1μL RNA加Cap0反应液C 1μL RNA加Cap0酶，10U/μL 1μL - 最后将冰上放置的15μL无帽RNA加入并轻柔吹打混匀。
- 37℃保温2小时。
- 得到的Cap0 RNA可以纯化后用于制备Cap1 RNA，也可以用于polyA加尾。如果需要直接用无帽RNA一步制备Cap1 RNA，建议改用本公司的RNA加Cap1试剂盒。
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